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内容大纲
本书由五部分内容组成,其中前三部分为主体,分别为生物化学与分子生物学实验基本知识,包括实验室规则及安全规程、常用仪器、实验基本操作与要求等内容;生物化学与分子生物学实验技术和方法,主要介绍分光光度、膜分离、离心、层析、电泳、PCR、分子克隆、核酸分子杂交、基因编辑和微卫星标记等技术;生物化学与分子生物学实验,涵盖了生物化学实验、分子生物学实验、综合实验和设计实验。第四部分为主要参考文献;第五部分是附录A,主要为常用试剂、培养基的配制方法。
本书较为全面地介绍了开展生物化学、分子生物学科学研究所涉及的实验技术、实验原理,有助于读者了解实验仪器、实验流程和实验操作,可供生物科学、生物技术、生物医学等生命科学类专业的本科生和研究生使用,同时也可供从事生物学类专业的教学、科研和技术人员参考。 -
作者介绍
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目录
第一章 生物化学与分子生物学实验基本知识
第一节 实验室规则及安全规程
第二节 常用仪器介绍
第三节 实验基本操作
第四节 实验的基本要求
第二章 生物化学与分子生物学实验技术和方法
第一节 分光光度技术
第二节 膜分离技术
第三节 离心技术
第四节 层析技术
第五节 电泳技术
第六节 PCR(聚合酶链式反应)技术
第七节 分子克隆技术
第八节 核酸分子杂交技术
第九节 基因编辑技术
第十节 微卫星标记技术
第三章 生物化学与分子生物学实验
第一节 生物化学实验
实验一 糖定量测定(蒽酮法)
实验二 糖的呈色反应和定性鉴定
实验三 脂肪皂化值的测定
实验四 氨基酸的分离与鉴定
实验五 氨基酸和蛋白质的呈色反应
实验六 胡萝卜素的柱层析分离
实验七 牛乳中蛋白质的提取与鉴定
实验八 谷胱甘肽的测定及其抗氧化功能的检测
实验九 紫外光吸收法测定蛋白质含量
实验十 蛋白质的定量测定——双缩脲试剂法(Biuret法)
实验十一 考马斯亮蓝染色法测定蛋白质含量
实验十二 蛋白质的沉淀和等电点的测定
实验十三 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质
实验十四 血红蛋白的凝胶过滤
实验十五 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质的相对分子质量
实验十六 醋酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白质
实验十七 蔗糖酶与淀粉酶的专一性
实验十八 胰蛋白酶和胃蛋白酶活力测定
实验十九 枯草杆菌蛋白酶活力测定
实验二十 亲和层析法从鸡蛋清中分离溶菌酶
实验二十一 影响酶活性的因素
实验二十二 胰蛋白酶米氏常数的测定
实验二十三 丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制作用
实验二十四 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离过氧化物同工酶
实验二十五 凝胶层析法分离纯化脲酶
实验二十六 胰蛋白酶抑制剂的制备与抑制活性的测定
实验二十七 水果或蔬菜中抗坏血酸的测定(2,6-二氯酚靛酚法)
实验二十八 碱性SDS法提取大肠杆菌质粒
实验二十九 植物DNA的提取与测定
实验三十 植物总RNA的提取与分析
实验三十一 酵母核糖核酸的分离及组分鉴定
实验三十二 动物肝脏DNA的提取
实验三十三 核酸的定量测定——分光光度法(Nanodrop法)
实验三十四 动物肝脏RNA的制备
实验三十五 mRNA的分离纯化
实验三十六 分光光度法测定丙酮酸的含量
实验三十七 糖酵解中间产物的鉴定
实验三十八 脂肪酸β-氧化作用
实验三十九 植物体内的转氨基作用
第二节 分子生物学实验
实验四十 PCR(聚合酶链式反应)技术扩增目的基因片段
实验四十一 DNA琼脂糖凝胶电泳
实验四十二 大肠杆菌感受态细胞的制备
实验四十三 PCR产物的纯化
实验四十四 重组DNA分子连接及转化
实验四十五 转化茵落PCR检测
实验四十六 质粒DNA的酶切与琼脂糖电泳鉴定
实验四十七 cDNA文库的构建
实验四十八 Southern印迹杂交
实验四十九 Northern印迹杂交
实验五十 蛋白质的免疫印迹——Western印迹
实验五十一 蛋白质免疫共沉淀实验
实验五十二 逆转录PCR(RT-PCR)
实验五十三 实时定量PCR
第三节 综合实验
实验五十四 探究sRNA对大肠杆菌中外源GFP基因表达的抑制
实验五十五 基于16S rRNA序列分析等相关技术鉴定微生物
实验五十六 古DNA的提取与文库构建
第四节 设计实验
实验五十七 人类微卫星标记多样性的检测
实验五十八重要蛋白质的分离纯化
实验五十九青豌豆素的分离纯化及其鉴定
实验六十 转基因植物的PCR鉴定
实验六十一 土壤酶活性鉴定与分析
实验六十二 外源基因在大肠杆菌中的诱导表达
主要参考文献
附录A
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