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内容大纲
本书系统地介绍了分子生物学研究中一些常规实验技术的原理、操作步骤及注意事项。全书共9章,内容包括基因克隆技术、表达载体构建、植物转基因技术、基因表达分析技术、蛋白质表达与纯化、蛋白质-DNA相互作用分析、蛋白质-蛋白质相互作用分析、蛋白质组学以及代谢组学。
本书可供高等院校生命科学类专业的教师和学生使用,也可供相关专业研究人员参考。 -
作者介绍
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目录
第一章 基因克隆技术
实验1-1 基因组DNA提取
实验1-2 总RNA提取
实验1-3 PCR扩增
实验1-4 RT-PCR
实验1-5 琼脂糖凝胶电泳
实验1-6 PCR产物与T载体的连接
实验1-7 大肠杆菌感受态细胞制备
实验1-8 大肠杆菌转化实验
实验1-9 菌落PCR筛选重组子
实验1-10 重组质粒DNA的提取
实验1-11 重组质粒PCR和酶切验证
第二章 表达载体构建
实验2-1 RNAi表达载体构建
实验2-2 超表达载体构建
实验2-3 敲除载体构建
第三章 植物转基因技术
总实验原理
实验3-1 农杆菌感受态制备
实验3-2 农杆菌接合转移
实验3-3 拟南芥花序侵染转化
实验3-4 白菜遗传转化
实验3-5 甘蓝遗传转化
实验3-6 油菜遗传转化
实验3-7 番茄遗传转化
实验3-8 马铃薯遗传转化
实验3-9 辣椒遗传转化
实验3-10 水稻遗传转化
实验3-11 小麦遗传转化
实验3-12 玉米遗传转化
第四章 基因表达分析技术
实验4-1 亚细胞定位
实验4-2 原位杂交
实验4-3 Northern blot
实验4-4 实时荧光定量PCR
实验4-5 转录组测序及数据分析
第五章 蛋白质表达与纯化
实验5-1 大肠杆菌原核表达
实验5-2 毕赤酵母的诱导表达
实验5-3 蛋白提取及纯化
实验5-4 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳
实验5-5 Western blot
第六章 蛋白质-DNA相互作用分析
实验6-1 酵母单杂交
实验6-2 双荧光素酶报告基因实验
实验6-3 GUS染色报告基因实验
实验6-4 转录活性验证实验
实验6-5 凝胶迁移实验
实验6-6 ChIP-qPCR
第七章 蛋白质-蛋白质相互作用分析
实验7-1 酵母双杂交
实验7-2 双分子荧光互补
实验7-3 GST pull-down实验
实验7-4 CoIP实验
第八章 蛋白质组学
实验8-1 聚丙烯酰胺双向电泳技术
实验8-2 质谱分析
第九章 代谢组学
附录
附录1 常用试剂及培养基的配制
附录2 常用生物学软件和网站
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