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内容大纲
本书前两版被许多院校用作教材,广受师生。新版留了原有的大分内容,涵盖显微镜技术、组织学基本技术、细胞结构与成分的显示技术、细胞生理实验、细胞培养与分析、干细胞培养及诱导分化、细胞周期分析、细胞成分的分离与分析、细胞工程基础技术、细胞凋亡的测定、染色体技术和分子细胞生物学技术。也根据反馈意见和当前研究热点,新增了类器官培养方法和适用于不同应用场景下的多种外泌体提取技术。这些新增内容不仅反映了技术方法的前沿性,更能让读者能够熟悉与掌握这些新的技术方法,以便在今后的研究中进行更深入和更高层次的探索。
新版继续将所介绍的方法分为基本方案、备择方案和支持方案三类,各个学校及有关研究机构可以根据具体情况和实验条件灵活选择和运用。
本书可以作为医药院校和相关高等院校的本科和研究生教材,也可供从事细胞生物学研究工作的人员阅读参考。 -
作者介绍
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目录
第一章 显微镜技术
基本方案1 普通显微镜的构造及使用方法
基本方案2 相差显微镜的构造及使用方法
基本方案3 荧光显微镜的构造及使用方法
基本方案4 透射电子显微镜与薄切片技术
基本方案5 扫描电子显微镜与样品制备
备择方案1 激光扫描共聚焦显微镜的构造及使用方法
备择方案2 激光捕获显微切割技术
支持方案 显微摄影技术
第二章 组织学基本技术
基本方案1 石蜡切片技术
基本方案2 冰冻切片技术
基本方案3 苏木-伊红(hematoxylin-eosin staining,HE)染色技术
备择方案1 吉姆萨(Giemsa)染色技术
备择方案2 组织学切片的福尔根(Feulgen)染色技术
备择方案3 中性脂肪油红O显示(oil red O staining)技术
备择方案4 组织切片的碱性磷酸酶染色技术(ALP钙-钴法)
备择方案5 组织切片的琥珀酸脱氢酶染色(SDH staining)技术
备择方案6 组织切片的核酸甲苯胺蓝显示技术
第三章 细胞结构与成分的显示技术
基本方案1 细胞中DNA和RNA的显示
基本方案2 细胞中过氧化物酶的显示
基本方案3 细胞中碱性蛋白质的显示
基本方案4 一氧化氮合酶的显示
基本方案5 细胞中线粒体的活体染色
基本方案6 细胞中糖类和脂类的显示
基本方案7 酸性磷酸酶的显示
备择方案1 细胞中液泡系的活体染色
备择方案2 培养细胞完整生物膜系统的观察
备择方案3 微丝的染色及形态观察
支持方案 间接疫荧光技术显示胞质微管
第四章 细胞生理实验
基本方案1 细胞的运动
基本方案2 细胞的吞噬活动
基本方案3 细胞自噬检测方法
备择方案 细胞膜通透性的测定
第五章 细胞培养和分析
基本方案1 细胞的原代培养
基本方案2 培养细胞的形态观察和计数
基本方案3 培养细胞生长曲线的绘制和分裂指数的测定
基本方案4 细胞集落形成实验
基本方案5 器官培养方法
基本方案6 鸡胚尿囊培养法
备择方案1 细胞的传代培养
备择方案2 MTT对细胞生长状况的检测
备择方案3 表皮细胞的培养
备择方案4 骨骼肌细胞的培养
备择方案5 内皮细胞的培养
备择方案6 经胶质细胞的培养
备择方案7 骨髓间充质干细胞的培养及其体外诱导分化
支持方案1 细胞的冻存与复苏
支持方案2 细胞显微测量技术
支持方案3 细胞培养中支原体污染的检测
支持方案4 放射自显影术及同位素液闪测定
第六章 干细胞培养及诱导分化
基本方案1 人胚胎干细胞传代培养
基本方案2 人胚胎干细胞的诱导分化
基本方案3 肿瘤干细胞的分离纯化
备择方案1 诱导多能干细胞
备择方案2 类器官的培养与传代
支持方案 小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)的分离及饲养层的制备
第七章 外泌体的提取和鉴定
基本方案1 细胞上清液准备
基本方案2 采用速离心法提取外泌体
基本方案3 采用滤法提取外泌体
基本方案4 采用电镜观察外泌体形态
基本方案5 采用纳米颗粒跟踪分析(NTA)鉴定外泌体粒径
第八章 细胞周期分析
基本方案 流式细胞仪检测细胞周期
备择方案1 细胞同步化实验
备择方案2 通过分析CDK的活性检测细胞周期
第九章 细胞成分的分离与分析
基本方案1 差速离心法分离细胞和细胞器
基本方案2 密度梯度离心法分离细胞组分
基本方案3 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质
基本方案4 Western印迹技术
备择方案 疫沉淀法
支持方案 蛋白质的双向聚丙烯酰胺凝胶电泳
第十章 细胞工程基础技术
基本方案1 细胞融合实验
基本方案2 单克隆抗体的制备
备择方案1 染色体提前凝集标本的制备
备择方案2 显微注射技术(核移植)
备择方案3 DNA转染实验(绿色荧光蛋白)
支持方案 体外受技术
第十一章 细胞凋亡的测定
基本方案1 凋亡细胞的普通光镜观察
基本方案2 凋亡细胞的荧光显微镜观察
基本方案3 凋亡细胞的琼脂糖凝胶电泳检测——DNA梯状条带
备择方案1 凋亡细胞的电镜观察
备择方案2 凋亡细胞的原位末端标记法检测
备择方案3 凋亡细胞的单细胞凝胶电泳检测
备择方案4 凋亡细胞的流式细胞法检测
支持方案 磷脂酰丝氨酸外化的流式细胞术分析
第十二章 染色体技术
基本方案1 染色体标本制备
基本方案2 端粒及端粒酶显示技术
备择方案1 染色体显带技术
备择方案2 性染色质的制备
备择方案3 姐妹染色单体交换实验
备择方案4 染色体原位杂交技术
支持方案 染色体实验试剂配制
第十三章 分子细胞生物学技术
基本方案1 DNA提取及检测
基本方案2 RNA提取及检测
基本方案3 Southern印迹技术
基本方案4 Northern印迹技术
基本方案5 RNA干扰技术
基本方案6 酵母双杂交技术
备择方案1 RT-PCR
备择方案2 原位PCR技术
备择方案3 荧光定量PCR技术
备择方案4 基因芯片技术
备择方案5 原位缺口平移技术
备择方案6 染色质疫沉淀法
备择方案7 昆虫杆状病毒表达系统
备择方案8 GST pull-down分析
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