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内容大纲
本书共分为10章,内容涵盖实验室规则、常用设备操作,以及基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程、食品生物技术和生物分离工程等实验项目,还包含生物分子的生物信息分析、分子改造及发酵过程的虚拟仿真等综合实验。
在编写过程中,本书注重培养实验研究过程中的多种能力、素质和创新意识,并有机融入思政元素。作为新形态教材,本书还配套了实验教学视频,便于学生和实验操作人员学习。
本书适合作为生物工程、生物技术及相关专业的本科实验教学用书,也可供生物工程相关领域的研究人员作为实验参考。 -
作者介绍
吴元锋 博士、教授、博士生导师,毕业于浙江大学,美国伊利诺伊大学厄巴纳-香槟分校访问学者。担任浙江科技大学生物与化学工程学院副院长,兼任浙江省食品学会青年工作委员会副主任委员、浙江省微生物学会理事等。主要从事植物天然产物提取、生物转化及活性方面的研究。承担“生物工程专业实验”“分子生物学与基因工程”等课程的教学工作。主持国家和省级项目9项;牵头获得浙江省科学技术进步奖二等奖1项、中国商业联合会科学技术奖一等奖1项,参与获得中国食品工业协会科学技术奖特等奖等6项。发表学术论文60余篇,其中以第一/通讯作者发表论文48篇;获发明专利授权15件,其中以第一发明人授权7件;参与制定国家标准和团体标准2项;参编教材和专著3部。 -
目录
第一章 实验室与实验的一般准则
第一节 实验室一般准则
一、实验室准则要点
二、实验室基本设施安全使用准则
三、实验室危险化学品使用准则
四、实验室生物安全防护
五、实验室环保准则
第二节 实验开展的一般准则
一、实验方案确定准则
二、实验内容确定准则
三、实验设计准则及方法
第三节 实验数据分析与报告撰写
一、实验数据分析及方法
二、实验报告撰写规范
第四节 实验资料及其检索方法
一、实验室常用工具书
二、生命科学与生物工程领域主要期刊
三、生命科学与生物工程重要文献资源
四、文献及网络信息检索方法
第五节 实验室道德规范
第二章 生物工程实验常用仪器与设备
第一节 分析检测设备
一、分光光度计
二、气相色谱仪
三、液相色谱仪
四、气相色谱 质谱联用仪
五、液相色谱 质谱联用仪
第二节 生物制品制备相关设备
一、发酵设备
二、提取设备
三、纯化设备
四、浓缩和干燥设备
第三节 现代生物技术设备
一、电泳设备
二、凝胶成像系统
三、PCR仪
四、免疫印迹
五、酶标仪
六、流式细胞仪
第三章 基因工程实验
实验1 PCR扩增目的基因
实验2 质粒DNA的提取、分离纯化和酶切鉴定
实验3 感受态细胞的制备
实验4 重组质粒的连接、转化及筛选
实验5 目的基因原核表达质粒的构建
实验6 外源基因在大肠杆菌中的诱导表达
实验7 表达蛋白的SDS PAGE分析
第四章 细胞工程实验
实验8 海洋微藻细胞固定化培养技术
实验9 绿色荧光蛋白的异源表达
实验10 红曲霉原生质体的制备与显微摄影
实验11 酿酒酵母的培养与转化
实验12 植物(胡萝卜)的组织培养
实验13 小鼠肝细胞原代培养
实验14 细胞传代培养
第五章 酶工程实验
实验15 产酶菌株的快速分离筛选——以纤维素酶产生菌为例
实验16 糖化酶的发酵、提取与酶活力测定
实验17 果胶酶的发酵、提取与酶活力测定
实验18 利用亲和层析法从鸡蛋清中分离溶菌酶
实验19 α淀粉酶的固定化和酶活力测定
实验20 红曲霉酯酶同工酶鉴定技术
第六章 发酵工程实验
实验21 发酵菌种的复壮和保藏
实验22 大肠杆菌生长曲线的测定
实验23 发酵污染——噬菌体的检测
实验24 l乳酸发酵
实验25 丙酮酸发酵
实验26 柠檬酸发酵
实验27 枯草芽孢杆菌发酵
实验28 淀粉酶固态发酵
实验29 小型连续发酵
第七章 食品生物技术实验
实验30 甜酒酿发酵
实验31 干红葡萄酒酿造
实验32 酱油酿造
实验33 米醋酿造
实验34 啤酒发酵
实验35 特色食药用真菌菌种生产
实验36 乳酸菌的分离纯化以及凝固型酸奶发酵
实验37 浓香型杭白菊速溶粉制备
实验38 纳豆制作及其抗菌性实验
第八章 生物分离工程实验
实验39 RNA制备和核苷酸的离子交换层析分离
实验40 冬虫夏草菌丝培养及胞内多糖的提取
实验41 膜分离法精制浓缩酶
实验42 海带中岩藻聚糖硫酸酯的提取
实验43 食用菌多糖的提取及初步纯化
实验44 血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳
实验45 利用盐析和等电点沉淀法从牛乳中制备酪蛋白
实验46 离子交换层析分离氨基酸
实验47 大蒜细胞超氧化物歧化酶的提取与分离
实验48 双水相体系中蛋白质分配系数的测定
实验49 离子交换树脂总交换容量的测定
第九章 综合实验:脂肪酶表达载体构建、表达与纯化
实验50 细菌基因组的提取
实验51 基因的PCR扩增及产物纯化
实验52 细菌质粒提取
实验53 载体质粒、PCR产物的双酶切及酶切产物的纯化
实验54 重组载体的构建及转化
实验55 重组子的筛选与测序验证
实验56 基因工程菌菌种的活化及扩大培养
实验57 基因工程菌发酵工艺
实验58 发酵过程中残糖、生物量及表达产物含量的测定
实验59 脂肪酶的表达及分离纯化
实验60 SDS PAGE凝胶电泳
实验61 脂肪酶活力测定
第十章 综合实验:生物分子的生物信息分析、分子改造及发酵过程的虚拟仿真
实验62 目的基因的结构鉴别、蛋白质预测和系统发育分析
实验63 应用拉氏图信息提升谷氨酸脱羧酶的热稳定性
实验64 乳酸菌发酵生产γ氨基丁酸过程优化及放大虚拟仿真实验
附录一 常见元素的相对原子质量表
附录二 化学试剂的规格
附录三 法定计量单位和单位换算
附录四 生物工程单元操作实验中的常用数据表
附录五 常用培养基和缓冲液的配制方法
参考文献
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