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内容大纲
《细胞培养技术》获首届全国优秀教材奖,入选“十四五”职业教育国家规划教材。教材秉持“做中学、行中导”理念,构建符合企业细胞培养岗位需求和学生成长规律的内容体系,同时融入项目教学、任务驱动和行为引导等现代职教方法,聘请企业一线专家参与教材建设,开发企业真正用得上的教学内容。教材中的六个模块均取材于企业典型工作任务,包括“动物细胞培养的准备”“动物细胞的原代培养”“动物细胞的传代、冻存和复苏”“动物细胞的大规模培养”“单克隆抗体生产细胞的制备”和“植物细胞的悬浮培养”,这些模块又被细分为15项具体任务。教材采用“富媒体”编写理念,每个模块都附有配套的实操视频、图片和教学课件等多种数字资源,读者通过扫描二维码,即可获得制作精良的多媒体学习素材。另外,本书每个任务还附有配套的《学生工作手册》以引导教材使用者自主学习。教材全面贯彻党的教育方针,落实立德树人根本任务,有机融入党的二十大精神。
本教材适合高等职业院校生物技术相关专业使用,也可作为生物技术人员的参考书和培训教材。 -
作者介绍
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目录
模块一 动物细胞培养的准备
【背景描述】
【学习目标】
【模块任务】
任务1-1 动物细胞培养器材的准备
必备知识
一、动物细胞培养的基本概念及优缺点
二、动物细胞培养的环境条件
三、动物细胞培养实验室的设计与布局
四、动物细胞培养设备
五、动物细胞培养用品
操作规程
一、动物细胞培养常用设备的使用
二、动物细胞培养用品的清洗、包装和灭菌
任务1-2 动物细胞培养用液的准备
必备知识
一、培养细胞的营养需要
二、动物细胞培养用液
三、动物细胞培养常用的消毒和无菌处理方法
四、动物细胞培养工作的基本要求和工作方法
操作规程
一、动物细胞培养用液的配制和无菌处理
二、动物细胞培养的无菌操作
【拓展知识】
一、动物细胞培养发展史
二、动物细胞培养的应用
三、动物细胞培养的其他常用液
【巩固提升】
一、巩固练习
二、进阶训练
模块二 动物细胞的原代培养
【背景描述】
【学习目标】
【模块任务】
任务2-1 组织块法培养鸡胚成纤维细胞
必备知识
一、培养细胞的细胞生物学
二、培养细胞的取材
三、组织块培养法
四、培养细胞的观察和检测技术
操作规程
一、鸡胚成纤维细胞的原代培养(组织块法)
二、体外培养细胞的常规观察
任务2-2 消化法培养鸡胚成纤维细胞
必备知识
一、组织材料的分离
二、消化培养法
三、细胞计数
操作规程
鸡胚成纤维细胞的原代培养(消化法)
【拓展知识】
一、动物正常组织细胞的培养
二、肿瘤细胞培养
【巩固提升】
一、巩固练习
二、进阶训练
模块三 动物细胞的传代、冻存和复苏
【背景描述】
【学习目标】
【模块任务】
任务3-1 鸡胚成纤维细胞的传代培养
必备知识
一、动物细胞传代培养技术
二、细胞系的维持
操作规程
鸡胚成纤维细胞的传代
任务3-2 鸡胚成纤维细胞的冻存和复苏
必备知识
一、细胞冻存技术
二、细胞复苏技术
三、细胞活性检查方法
操作规程
一、鸡胚成纤维细胞的冻存
二、鸡胚成纤维细胞的复苏
三、鸡胚成纤维细胞的活性检查
【拓展知识】
一、培养细胞的运输和短期保存
二、干细胞培养
三、三维细胞培养
【巩固提升】
一、巩固练习
二、进阶训练
模块四 动物细胞的大规模培养
【背景描述】
【学习目标】
【模块任务】
任务4-1 CHO细胞大规模贴壁培养
必备知识
一、动物细胞大规模培养的一般工艺流程
二、动物细胞大规模贴壁培养常用的方法
操作规程
发酵罐大规模贴壁培养CHO细胞
任务4-2 CHO细胞大规模悬浮培养
必备知识
一、动物细胞大规模悬浮培养技术
二、动物细胞培养反应器
三、动物细胞大规模培养技术的操作方式
操作规程
一次性生物反应器大规模悬浮培养CHO细胞
【拓展知识】
一、动物细胞大规模培养常用细胞系
二、细胞生物反应器放大技术
三、动物细胞固定化培养
【巩固提升】
一、巩固练习
二、进阶训练
模块五 单克隆抗体生产细胞的制备
【背景描述】
【学习目标】
【模块任务】
任务5-1 人PD-L1免疫动物的准备
必备知识
一、单克隆抗体的概念
二、杂交瘤技术制备单克隆抗体的基本原理
三、杂交瘤技术制备单克隆抗体的主要过程
四、动物免疫
操作规程
人PD-L1免疫小鼠的准备
任务5-2 骨髓瘤细胞和脾细胞的融合与筛选
必备知识
一、脾细胞、骨髓瘤细胞及饲养细胞的准备
二、细胞融合和杂交瘤细胞的筛选
操作规程
骨髓瘤细胞与脾细胞的融合(PEG融合法)
任务5-3 抗人PD-L1杂交瘤细胞的筛选
必备知识
一、酶联免疫吸附法
二、双向扩散法
操作规程
酶联免疫吸附法筛选阳性杂交瘤细胞
任务5-4 抗人PD-L1杂交瘤细胞的单克隆化
必备知识
一、有限稀释法
二、软琼脂平板法
三、显微镜操作法
四、流式细胞荧光分选技术
操作规程
有限稀释法单克隆化阳性杂交瘤细胞
【拓展知识】
一、杂交瘤技术的诞生
二、杂交瘤细胞株的冻存和复苏
三、单克隆抗体的大量制备与纯化
四、细胞的基因转染技术
【巩固提升】
一、巩固练习
二、进阶训练
模块六 植物细胞的悬浮培养
【背景描述】
【学习目标】
【模块任务】
任务6-1 MS培养基的制备
必备知识
一、植物组织和细胞培养的基本概念
二、植物细胞培养的实验室条件
三、植物细胞培养的培养基
操作规程
MS培养基的配制和灭菌
任务6-2 胡萝卜愈伤组织的诱导
必备知识
一、外植体的选择和预处理
二、植物愈伤组织的形成过程
三、植物愈伤组织培养的一般程序
四、植物组织细胞培养的无菌操作
操作规程
胡萝卜愈伤组织的诱导和继代
任务6-3 胡萝卜细胞的悬浮培养
必备知识
一、单细胞的分离
二、悬浮培养细胞的生长和测定
三、植物细胞悬浮培养方式
四、悬浮培养细胞的同步化
五、植物细胞培养的环境条件
操作规程
胡萝卜悬浮细胞系的建立与继代
【拓展知识】
一、植物组织细胞培养的发展史
二、植物组织细胞培养的应用
三、植物细胞的固定化培养
四、植物单细胞培养
【巩固提升】
一、巩固练习
二、进阶训练
附录 细胞培养技术常用术语中英文对照
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