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- 基因工程实验原理(全国高等院校医学整合教材)
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- 作者：编者:杜冠魁|责编:谢贞静//吕肖剑
- 出版社：中山大学
- ISBN：9787306081483
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售价：27.2
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内容大纲
本书系统地梳理了基因工程领域中的一系列常用技术，包括聚合酶链式反应（PCR，用于扩增特定DNA片段）、基因克隆技术（如质粒构建、转化、筛选）、基因编辑技术（如CRISPR－Cas9系统）、DNA测序与生物信息学分析以及基因表达技术调控等。每一项技术都配以详尽的基本原理阐述，力求使读者不仅知其然，更知其所以然。
为了将理论知识与实际操作紧密结合，本书构建了由浅入深、循序渐进的实验课程体系。从基础的DNA提取、PCR扩增等基础实验入手，旨在帮助学生掌握基因工程的基本操作技能和实验设计思路。随后，课程逐步升级至综合性实验，如基因敲除／敲入实验、转基因动植物模型的构建及基于基因工程的药物开发初步研究等共计8个大型综合性实验，这些实验不仅要求学生具备扎实的理论基础，还考验着他们的创新思维和解决问题的能力。教师可根据教学需求和学生兴趣，灵活选择其中的1～2个实验进行开设，确保教学内容的针对性和实效性，同时，这也解决了传统实验教学中综合性实验资源匮乏的问题。此外，本书通过引入最新的研究成果和技术进展，丰富实验案例库，为师生提供了更多的实验选择和探索空间。
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作者介绍
杜冠魁，教授，博士研究生导师及硕士研究生导师，获海南省南海青年名家、海南省高层次人才“拔尖人才”、海南省“515人才工程”第三层次人才等荣誉。
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目录
引言
第一部分 基因工程原理
第一章 基因工程的概念
第一节 基因工程的发展简史
第二节 基因工程的研究意义和应用
第二章 基因工程的常用工具酶
第一节 限制性核酸内切酶
第二节 DNA连接酶
第三节 其他的工具酶
第三章 基因工程常用载体
第一节 基因工程载体概述
第二节 质粒载体
第三节 噬菌体载体
第四节 黏粒
第五节 酵母人工染色体载体
第六节 细菌人工染色体载体
第七节 表达载体
第四章 基因工程常用技术
第一节 核酸的分离纯化
第二节 PCR技术
第三节 电泳技术
第四节 分子杂交技术
第五节 DNA序列测定技术
第五章 目的基因获取技术
第二部分 基因工程基础实验
实验1 真核生物基因组DNA的提取
实验2 哺乳动物细胞总RNA和mRNA的提取
实验3 质粒DNA的提取
实验4 PCR扩增碱性磷酸酶基因
实验5 限制性核酸内切酶的酶切反应
实验6 凝胶电泳法进行DNA的分离和纯化
实验7 DNA片段的体外连接
实验8 大肠杆菌感受态细胞的制备
实验9 重组子的转化
实验10 菌落PCR筛选阳性重组子
实验11 重组质粒的酶切鉴定
实验12 外源基因在大肠杆菌中的诱导表达
实验13 基因表达产物的检测分析：SDS PAGE
实验14 蛋白质印迹法
实验15 DNA印迹实验
实验16 全长cDNA文库的构建
实验17 大鼠脂肪干细胞的提取鉴定及外泌体的提取
实验18 Trizol法提取DNA、RNA和蛋白质
第三部分 基因工程综合性实验
综合性实验1 重组蔗糖磷酸化酶在大肠杆菌中的表达及酶活性测定
综合性实验2 微生物荧光表达与绘画
综合性实验3 EGFP基因的定点突变
综合性实验4 蛋白的亚细胞定位
综合性实验5 酵母单杂交实验
综合性实验6 酵母双杂交实验
综合性实验7 CRISPR Cas9基因编辑系统
综合性实验8 农杆菌介导的模式植物遗传转化
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