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内容大纲
本书紧扣基因工程操作的“分、切、连、转、筛”主线，将“基因工程原理”（第一部分）与“基因工程实验指导”（第二部分）有机融合。全书系统阐释了基本概念、核心原理及完整流程，兼具系统性、实用性与前沿性，填补了此类教材的空白。在内容上，本书在第一版基础上进行了全面更新，不仅引入了新方法、新技术，还增补了CRISPR/Cas基因编辑、合成生物学等前沿知识。在编写特色上，本书采用“图示化”手段，将复杂的原理和实验操作化繁为简；书中总结的“基因工程易出错误及对策”，凝聚了编者20余年的教学与科研经验，在国内外同类书籍中独具特色；此外，每章还精心设置了清晰明快的“引子”“课外阅读”。
本教材既可作为生物工程、生物技术、生物科学等专业本科生及研究生的教学用书，也可供相关科研人员参考。 -
作者介绍
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目录
第一部分 基因工程原理
第一章 绪论
第一节 引言
第二节 基因工程的研究内容
第三节 基因工程的应用
第四节 基因工程安全性
课外阅读
思考题
第二章 DNA重组工具酶
第一节 限制性内切酶
第二节 连接酶
第三节 同源重组酶RecET
第四节 基因组编辑酶CRISPR/Cas9
第五节 基因工程其他工具酶
课外阅读
思考题
第三章 基因工程载体
第一节 质粒的一般特性
第二节 常用的质粒克隆载体
第三节 常用的质粒表达载体
第四节 其他载体
课外阅读
思考题
第四章 聚合酶链式反应
第一节 PCR原理
第二节 PCR反应体系及扩增程序
第三节 引物设计原则及引物合成
第四节 PCR产物的电泳分离及纯化
课外阅读
思考题
第五章 基因制备
第一节 直接分离基因
第二节 PCR法扩增基因
第三节 从基因文库中获取基因
第四节 噬菌体表面展示与细胞表面展示
第五节 酵母双杂交技术
第六节 化学合成法
课外阅读
思考题
第六章 DNA重组及导入受体细胞
第一节 DNA重组
第二节 外源DNA导入原核生物
第三节 外源DNA导入植物细胞
第四节 外源DNA导入动物细胞
课外阅读
思考题
第七章 外源基因的表达
第一节 外源基因在大肠杆菌中的表达
第二节 工程菌株发酵条件优化及高密度培养
第三节 外源基因在其他系统中的表达
课外阅读
思考题
第八章 基因工程应用及其安全性
第一节 基因工程药物
第二节 转基因植物
第三节 转基因动物
第四节 基因治疗
第五节 基因芯片
第六节 基因工程在酶工程中的应用
第七节 基因工程在途径工程中的应用
第八节 基因工程在合成生物学中的应用
第九节 CRISPR/Cas基因编辑技术的应用
第十节 基因工程的安全性
课外阅读
思考题
第二部分 基因工程实验指导
第九章 实验相关知识
第十章 基因工程实验“兵法九条”
第十一章 基础实验内容及操作方案
实验一 质粒DNA的提取
实验二 PCR扩增木聚糖酶Xyn基因
实验三 琼脂糖凝胶电泳检测质粒、分离目的基因
实验四 目的基因的回收及与T-载体的连接
实验五 感受态细胞DH5α的制备
实验六 重组DNA转化受体细胞DH5α
实验七 转化子的筛选
第十二章 中级实验内容
实验八 基因的限制性酶切割及与pET表达载体的连接
实验九 转化受体细胞BL21（DE3）
实验十 外源蛋白的诱导表达
实验十一 SDS-PAGE检测外源蛋白
第十三章 高级实验内容
实验十二 CRISPR/Cas9断裂DSB
实验十三 CRISPR/Cas9断裂DSB的同源重组修复
第十四章 基因工程易出错误及对策
附录
参考文献
缩略语表
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